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內容簡介: |
生物化学与分子生物学是生命科学的前沿学科,其理论与基本实验技术已广泛渗透并应用于生命科学的各个领域。掌握生物化学与分子生物学的基本实验技术不仅是医学生的必备能力,也是实施创新教育的重要手段。为培养学生的动手能力、独立分析问题和独立解决问题的能力,《生物化学与分子生物学实验》在介绍生物化学与分子生物学基本实验操作和常用技术及仪器使用的基础上,根据实验内容的特点,将实验分成经实验、综合性实验、研究性实验和创新性实验,为本科生进行基本的科研训练提供帮助,并为开展创新性实验和科学研究提供思路。《生物化学与分子生物学实验》可供医学相关专业的本科生、研究生和科研工作者参考。
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目錄:
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目录前言概述 1一、生物化学与分子生物学实验课的性质、任务与目的 1二、生物化学与分子生物学实验室安全与规则 1三、实验报告书写 2第一章 基本实验操作与常用技术及仪器的使用 3第一节 基本实验操作 3一、玻璃器皿的洗涤与干燥 3二、移液器的使用 4三、液体的混匀 6四、沉淀的分离 6五、常用生物材料的处理 7第二节 常用技术及仪器的使用 9一、离心技术与离心机 9二、分光光度分析技术与分光光度计及酶标仪 10三、电泳技术与电泳仪.12四、层析技术与层析柱 16五、体外DNA扩增技术与PCR仪 20第二章 经典验证性实验 26实验一 蛋白质的盐析作用 26实验二 乳麵氢酶及其辅酶I的作用 27实验三 血清谷丙转氨酶活性的测定 29实验四 血糖浓度测定 32一、Folin-吴氏法 32二、葡萄糖氧化酶偶联法(GOD-POD法) 34实验五 胰岛素及肾上腺素对血糖浓度的影响 36实验六 运动对尿中乳酸含量的影响 37实验七 酮体的生成和利用 39实验八 胆固醇提取定性 40实验九 血清总胆固醇的测定 42一、醋酐-疏酸单一试剂显色法测定总胆固醇 42二、氧化酶法测定血清总胆固醇 43第三章 综合性实验 45实验十 蛋白质含量的测定 45一、紫外分光测定法 45二、Lowry法测定蛋白质含量 46三、考马斯亮蓝法 48实验十一 血清LDH同工酶谱分析 49一、乙酸纤维素薄膜电泳法 50二、琼脂糖凝肢电泳法 52实验十二 碱性磷酸酶仏值的测定 55实验十三 碱性磷酸酶分离纯化及比活性的测定 57一、減性鱗酸酶的提取分离和纯化 58二、碱性嶙酸酶比活性的测定 60实验十四 DNA琼脂糖凝胶电泳 63实验十五 聚合酶链式反应技术(PCR)体外扩增DNA 64实验十六 质粒DNA的制备(碱变性法) 66实验十七 血清蛋白质的电泳分离 69一、血清蛋白质乙酸纤维素薄膜电泳 69二、聚丙烯酰胺凝肢电泳(圆盘电泳) 71实验十八 SDS-PAGE电泳测定蛋白质的相对分子量 75实验十九 蛋白质印迹 79第四章 研究性实验 82实验二十 凝胶过滤层析法分离纯化脲酶 82实验二十一 离子交换层析法分离血清蛋白质 86实验二十二 RT-PCR技术 87一、总RNA的提取 87二、RT-PCR 89实验二十三 真核生物基因组DNA的提取与鉴定 90实验二十四 基因克隆及蛋白原核表达 92第五章 创新性实验 96实验二十五 食管癌基因的克隆及重组载体构建 96实验二十六 支架蛋白RACK1小干扰RNA抑制卵巢癌细胞CAOV3的增殖、迁移和侵袭 102附录 106附录1 常用溶液的配制 106附录2 常用培养基的配制 111彩图
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