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內容簡介: |
全书分为三篇。*篇为常用实验技术,包括分光光度技术、色谱技术、电泳技术、离心技术、蛋白质的分离与纯化、基因工程技术。第二篇为生物化学实验,第三篇为分子生物学实验。其中生物化学实验根据难度和要求,分为基础实验、提高型实验、综合型实验和研究创新型实验四个层次。基础实验有蛋白质含量的测定等,提高型实验有血清蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳等,综合型实验有血清白蛋白和球蛋白的盐析分离及总蛋白的测定,研究创新型实验有肝糖原的提取与鉴定等。此外,本书附录附有实验室常用数据,如不同动物血糖正常值等实验数据。
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目錄:
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目录
**篇 常用实验技术 1
**章 分光光度技术 1
第二章 色谱技术 4
**节 色谱法的概念及特点 4
第二节 常用的色谱方法 5
第三章 电泳技术 10
**节 基本原理 10
第二节 醋酸纤维素薄膜电泳 11
第三节 琼脂糖凝胶电泳 11
第四节 聚丙烯酰胺凝胶电泳 13
第五节 染色方法 17
第四章 离心技术 19
**节 离心理论 19
第二节 离心机操作要领 21
第五章 蛋白质的分离与纯化 22
**节 蛋白质分离与纯化的原理及方法 22
第二节 蛋白质的浓缩、干燥和保存 23
第六章 酶学分析 25
第七章 基因工程技术 28
**节 概述 28
第二节 聚合酶链反应扩增获取目的基因 28
第三节 基因载体的选择 29
第四节 基因工程常用的工具酶 30
第五节 重组体的构建 31
第六节 重组体导入受体细胞 31
第七节 重组子的筛选与鉴定 32
第二篇 生物化学实验 34
第八章 基本实验 34
实验一 蛋白质含量的测定 34
【同步练习题】 40
实验二 氨基酸的离子交换柱色谱分离 42
实验三 血红蛋白与核黄素的凝胶柱色谱分离 43
实验四 醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白 44
实验五 动物组织中核酸的提取与鉴定 46
【同步练习题】 48
实验六 蛋白质的透析纯化 51
实验七 血清过氧化氢酶Km值的测定 51
【同步练习题】 54
实验八 血糖含量的测定 56
实验九 胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响 59
【同步练习题】 60
实验十 血清三酰甘油(TG)含量的测定 63
【同步练习题】 66
实验十一 酮体的生成和利用 67
实验十二 血浆高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-Ch)含量的测定 71
【同步练习题】 72
实验十三 血清谷丙转氨酶(ALT)活性的测定 73
【同步练习题】 75
第九章 提高型实验 76
实验十四 血清蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳 76
实验十五 琥珀酸脱氢酶的抑制作用 78
第十章 综合型实验 80
实验十六 血清白蛋白和球蛋白的盐析法分离、白球比及总蛋白的测定 80
第十一章 研究创新型实验 82
实验十七 肝糖原的提取与鉴定 82
实验十八 不同组织ALT活性测定及温度、pH 的影响 82
附:肝糖原的提取与鉴定的原理和方法 83
第三篇 分子生物学实验 84
第十二章 分子生物学实验技术 84
实验十九 动物白细胞中DNA的提取(碘化钠法) 84
实验二十 组织细胞总RNA的提取 85
实验二十一 核酸的凝胶电泳 86
方案一 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 89
方案二 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 90
实验二十二 DNA为模板的聚合酶链式反应扩增 91
【同步练习题】 92
实验二十三 质粒DNA的提取(碱变性裂解法) 93
【同步练习题】 94
实验二十四 大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 95
实验二十五 载体与目的基因的连接 96
附录 实验室常用数据 97
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