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內容簡介: |
全书分为生物化学实验技术基础和生物化学实验两部分,共8章。*部分生物化学实验技术基础介绍生物化学实验须知和分光光度技术、离心技术、色谱技术、电泳技术四种常用的生物化学实验技术基本原理;第二部分生物化学实验包括基础实验、综合应用型实验和设计性实验共49个实验,保留了一些对加强学生基本实验方法和技能训练行之有效的传统实验,又紧跟生物化学发展的需要开设了综合应用型实验和设计性实验,使学生有一个完整的实验锻炼过程,培养学生科研思维和独立开展研究工作的能力。 本书可供全国高等院校生物、食品、环境、农学、林学、医学、药学等相关专业的学生和科技人员使用。
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目錄:
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第一部分生物化学实验技术基础 第1章生物化学实验须知1 1.1生物化学实验的目的1 1.2生化实验室实验规则1 1.3生化实验室安全及防护知识2 1.3.1实验室安全知识2 1.3.2实验室急救3 1.4实验误差与数据处理4 1.4.1系统误差4 1.4.2偶然误差4 1.4.3操作错误5 1.4.4数据处理5 1.5实验报告6 第2章分光光度技术7 2.1分光光度技术原理7 2.1.1光谱7 2.1.2光吸收定律8 2.2分光光度计的构造10 2.2.1光源10 2.2.2单色光器10 2.2.3比色皿12 2.2.4检测器12 2.37220型分光光度计13 2.3.1仪器外部结构及各部分名称和功能13 2.3.2仪器使用方法15 2.3.3注意事项15 2.4分光光度技术在生化试验技术中的应用16 第3章离心技术17 3.1离心技术的基本原理17 3.2离心机的类型和主要构造18 3.2.1离心机的类型18 3.2.2离心机的主要构造19 3.3离心方法的选择21 3.3.1差速离心21 3.3.2密度梯度离心21 3.4离心条件的确定22 3.4.1离心力22 3.4.2离心时间22 3.4.3温度23 3.4.4pH值23 第4章色谱技术24 4.1色谱技术原理24 4.2色谱的基本概念24 4.2.1固定相与流动相24 4.2.2分配系数与迁移率24 4.2.3分离度(分辨率)25 4.2.4交换容量(或操作容量)26 4.2.5正相色谱与反相色谱26 4.3色谱技术的分类26 4.3.1按流动相固定相分类26 4.3.2按实验方法分类27 4.3.3按分离的机制分类27 4.4常用的几种色谱技术28 4.4.1纸色谱28 4.4.2薄层色谱30 4.4.3离子交换色谱32 4.4.4凝胶色谱35 4.4.5高效液相色谱41 4.4.6气相色谱49 4.4.7亲和色谱51 第5章电泳技术60 5.1电泳的基本原理60 5.1.1电荷的来源60 5.1.2泳动度60 5.1.3影响电泳的主要因素61 5.2电泳的分类62 5.2.1按分离原理分类62 5.2.2按分离目的分类63 5.2.3按用途分类63 5.3常用的电泳技术63 5.3.1纸电泳63 5.3.2醋酸纤维薄膜电泳65 5.3.3琼脂糖凝胶电泳66 5.3.4聚丙烯酰胺凝胶电泳67 5.3.5毛细管电泳72 5.3.6免疫电泳技术73 5.3.7等电聚焦电泳74 5.3.8双向凝胶电泳77 第二部分生物化学实验 第6章生物化学基础实验79 实验1糖的颜色反应和还原性鉴定79 Ⅰ.莫氏(Molisch)反应鉴定糖79 Ⅱ.塞氏(Seliwanoff)反应鉴定酮糖81 Ⅲ.杜氏(Tollen)反应鉴定戊糖82 Ⅳ.糖的还原性鉴定82 实验2植物组织中可溶性糖含量测定——蒽酮比色法84 实验3还原糖和总糖的测定——3,5-二硝基水杨酸法87 实验4血糖的定量测定90 Ⅰ.邻甲苯胺法测定血糖含量90 Ⅱ.葡萄糖氧化酶法测定血糖含量(GOD-PAP法)92 实验5淀粉的提取、性质和含量测定93 实验6肝糖原的提取和鉴定96 实验7粗脂肪的含量测定——索氏抽提法97 实验8油脂的化学性质99 Ⅰ.油脂皂化值的测定99 Ⅱ.油脂酸值的测定101 Ⅲ.油脂碘值的测定101 实验9卵磷脂的提取及鉴定104 实验10血清总胆固醇的定量测定105 Ⅰ.磷硫铁法测定血清胆固醇106 Ⅱ. Abell法测定血清胆固醇107 Ⅲ.胆固醇氧化酶法测定血清胆固醇108 实验11蛋白质的颜色反应和沉淀作用110 Ⅰ.蛋白质的颜色反应110 Ⅱ.蛋白质的沉淀反应113 实验12蛋白质浓度测定(微量凯氏定氮法)115 实验13蛋白质含量测定——紫外吸收法117 实验14蛋白质的含量测定(二)——双缩脲法、考马斯亮蓝结合法、BCA法119 Ⅰ.双缩脲法测定蛋白质浓度119 Ⅱ.考马斯亮蓝结合法测定蛋白质浓度121 Ⅲ. BCA法测定蛋白质含量122 实验15非蛋白氮(NPN)的测定124 实验16DNP、DNS-氨基酸的制备和鉴定126 实验17肽的序列分析——PTH法130 实验18醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白132 实验19SDS-聚丙烯酰胺电泳法测定蛋白质的相对分子质量134 实验20血清白蛋白的分离与纯化138 实验21葡聚糖凝胶柱色谱分离纯化蛋白质140 实验22火箭免疫电泳143 实验23核酸的含量测定144 实验24DNA琼脂糖凝胶电泳147 实验25动物肝脏中DNA的提取与紫外检测148 实验26CTAB法提取植物基因组DNA150 实验27酵母RNA的提取与鉴定152 实验28质粒DNA的提取153 实验29肝脏中谷丙转氨酶的活力测定155 实验30过氧化氢酶米氏常数的测定157 实验31测定多种因素对唾液淀粉酶活力的影响159 实验32猪血中超氧化物歧化酶(SOD)的提取及活力测定161 实验33多酚氧化酶的制备和化学性质163 实验34维生素A的定性测定164 实验35维生素B1的定性测定165 实验36维生素C的定量测定(磷钼酸法)167 第7章综合应用型实验170实验37溶菌酶的提纯和活力测定170 实验38芦荟多糖的制备和含量测定172 实验39发酵过程中的无机磷和ATP检测174 实验40胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响176 实验41叶绿体色素的提取、分离和含量测定178 实验42用正交法测定几种因素对牛胰蛋白水解酶活力的影响180 实验43DNA聚合酶链式反应及产物鉴定(PCR)184 实验44气相色谱法检测果蔬中有机氯类和拟除虫菊酯类农药186 实验45质粒DNA的提取、酶切及鉴定189 实验46汉防己中生物碱的提取、分离和鉴定192 第8章设计性实验195 实验47果皮废弃物中果胶的制备195 实验48茶叶中茶多酚物质的提取与含量测定196 实验49蛋白质的表达、分离、纯化和鉴定197 附录198 附录1常用缓冲液的配制198 附录2硫酸铵饱和度常用表203 附录3常见蛋白质相对分子质量参考值(单位:Da)204 附录4色谱法常用数据及性质205 附录5各类物质常用的薄层显色剂208 附录6凝胶染料的种类及特点209 参考文献210
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內容試閱:
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近20年来,随着现代生物技术的发展,生物化学作为一门基础实验性学科,其研究方法和实验技术在不断向前发展进步。《生物化学实验》是海南大学生物工程系生物化学教学团队十多年实践和理论教学经验的结晶。 全书分为生物化学实验技术基础和生物化学实验两部分。第一部分生物化学实验技术基础介绍了生物化学实验须知和分光光度技术、离心技术、色谱技术、电泳技术四种常用的生物化学实验技术的基本原理; 第二部分生物化学实验共选编了49个实验,保留了一些对加强学生基本实验方法和技能训练行之有效的传统实验,又紧跟生物科学发展的需要开设了综合应用型实验和设计性实验,使学生有一个完整的实验锻炼过程,培养学生科研思维和独立开展研究工作的能力。本书附录部分包括各种常用数据表和有关参考资料,可供教师和学生查阅。 全书由罗先群、曹献英组织编写并统稿。第1~5章由罗先群、曹献英、张莉娜编写,第6章由张莉娜(实验1~实验10)、杨先会(实验11~实验33)、王小兵(实验34~实验36)编写,第7章由王小兵(实验37~实验46)编写,第8章由王小兵(实验47~实验49)编写。附录由罗先群和李小丽共同整理。本书编写过程中,李小丽、张苹、蔡雯雯、曾玲、普永权、张春媛、周方方、李唐元、刘雪冰做了大量细致的工作。本书的出版得到了海南大学化学化工学院领导的大力支持和帮助,在此对他们一并表示衷心感谢。 生物化学是蓬勃发展的学科,由于编者知识和经验有限,书中不足之处在所难免,敬请读者批评指正。 编者 2015年5月
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