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| 內容簡介： |
本书共分五章，全面系统地介绍了基因工程制药概论、基因工程制药、抗体工程制药、基因工程药物设计与研制方法、基因工程疫苗等内容，涵盖了研发基因工程药物的基本理论和相关技术。全书具有较强的理论性、科学性。
本书适合各高等院校生物制药专业及相关专业学生教学使用，也可供制药行业从事研究、设计和生产的工程技术人员参考。
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| 目錄：
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第一章基因工程制药概论1
第一节基因工程制药的发展历史1
一、传统的生物制药技术是现代生物制药的基础1
二、基因工程制药是现代生物技术制药发展的核心2
三、基因工程制药的现状及前景3
第二节基因工程药品的研发过程4
一、基因工程药品的实验室研究阶段5
二、基因工程药品的开发阶段5
三、基因工程药品的临床实验6
参考文献7
第二章基因工程制药9
第一节制药基因的克隆9
一、制药基因的获得9
二、制药基因与载体分子的体外连接反应15
三、将人工重组DNA分子导入到能够正常复制的宿主细胞中23
四、重组子的鉴定和筛选24
第二节重组蛋白表达系统25
一、原核表达系统25
二、酵母表达系统28
三、昆虫细胞表达系统31
四、哺乳动物细胞表达系统33
五、转基因植物表达系统37
六、转基因动物表达系统40
七、表达系统的选择43
第三节蛋白的分离纯化43
一、蛋白样品的前期处理44
二、蛋白分离纯化主要方法44
三、包涵体的分离纯化53
四、抗体的分离纯化56
第四节转染技术58
一、转染方法58
二、优化转染条件63
三、报告基因63
第五节融合标签65
一、融合标签的特征及分类65
二、融合标签各论65
第六节已投入市场的基因工程药物70
一、治疗用激素70
二、干扰素77
三、造血因子和凝血因子81
四、白细胞介素85
五、最新投入市场的药物86
参考文献87
第三章抗体工程制药88
第一节抗体88
一、抗原、抗体的概念及抗原抗体的关系 88
二、抗体的分子结构、功能及其酶解片段88
三、免疫球蛋白基因的结构和抗体多样性96
第二节单克隆抗体100
一、单克隆抗体产生的基本原理100
二、单克隆抗体的应用101
第三节基因工程抗体102
一、基因工程抗体的特点102
二、基因工程抗体的应用102
第四节抗体的氨基酸顺序105
第五节抗体分子的克隆108
一、抗体基因克隆的方法108
二、抗体基因克隆中的重要技术环节110
三、嵌合抗体113
四、改形抗体115
五、表面氨基酸残基的“人源化”——镶面抗体119
六、表位印迹选择119
七、单链抗体120
八、双特异性及多特异性抗体123
九、小分子抗体127
第六节筛选抗体克隆的展示技术129
一、噬菌体展示技术129
二、酵母表面展示系统132
三、核糖体展示技术134
四、细菌表面展示技术136
五、噬斑印迹 138
六、质粒展示技术138
第七节抗体亲和力的优化140
一、鼠源及其嵌合抗体的人源化140
二、通过改进亲和力来增加抗体的功效140
三、通过选择性的改进结合速率常数增加抗体功效141
四、构建广谱抗体141
第八节抗体药物142
一、概述142
二、FDA已批准的部分抗体按时间顺序排列143
参考文献150
第四章基因工程药物设计与研制方法151
第一节重组蛋白药物的复制151
一、复制生物技术药品的一般技术流程152
二、复制重组蛋白药品存在的问题152
第二节通过对现有药物的优化和改造研发新药154
一、定向突变155
二、定点突变160
三、糖基化工程与新药研究166
第三节创新药物设计167
一、通过筛选同源基因的方法发现新的药物基因或药物靶基因168
二、通过RNA的表达谱筛选新的药物基因和靶基因168
三、蛋白组学168
四、使用寡核苷酸技术证实药物分子169
五、基因功能的系统分析169
六、使用生物模型发现新药170
七、新药开发的展望171
参考文献171
第五章基因工程疫苗173
第一节疫苗的概述173
一、疫苗发展简史173
二、疫苗的种类174
三、疫苗基本成分和性质174
四、疫苗免疫途径175
第二节传统疫苗及其研发原则176
一、灭活疫苗176
二、弱毒疫苗178
第三节基因工程疫苗及其研发原则180
一、合成多肽疫苗及其研发原则180
二、亚单位疫苗及其研发原则181
三、基因缺失疫苗及其研发原则 182
四、重组活载体疫苗及其研发原则183
五、核酸疫苗及其研发原则187
第四节其他疫苗190
一、T细胞疫苗190
二、树突状细胞疫苗191
三、肿瘤疫苗194
四、避孕疫苗195
第五节免疫佐剂196
一、免疫佐剂的定义和特点196
二、佐剂的种类197
参考文献201
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| 內容試閱：
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现代生物技术（Biotechnology）的核心是重组DNA技术。1972年，斯坦福大学Paul Berg博士创造了第一个重组DNA，从而掀开了现代生物技术的新纪元。之后，加利福尼亚大学Herbert Boyer教授与Eli Lilly制药公司一起研制出人重组胰岛素，并于1982年正式推向市场，开创了基因工程制药的历史，开始了现代生物医药的商品化时代，即生物经济时代。在此之后的20多年中，基因工程制药得到了迅速发展。随着分子生物学的不断进步，如PCRRTPCR技术，基因芯片技术，荧光定量PCR技术，RNA干扰技术的问世，特别是人类基因组计划的完成，更加速了基因工程制药的发展步伐。
21世纪是生物技术世纪，一场生物产业革命正在兴起。在小分子药物陷入低谷的21世纪初始，生物医药却独树一帜，犹如初生的朝阳，蓬勃发展，生物医药公司纷纷成立。据美国生物技术工业组织统计，截至2004年3月中旬，美国已有1473个生物技术制药公司，总资产超过3110亿美元，雇员近20万人。生物技术制药已成为美国的重要产业之一。全球范围内正在研制的生物药物有2000多种，其中80%已进入临床试验。由于生物医药产品解决了常规药物无法解决的医学难题，生物医药产品的回报率令人瞩目，销售额逐年攀升。根据Johnson & Johnson 2008年的年终报告，年销售额最高的药物是治疗类风湿性关节炎的抗TNFα抗体药物Remicade（infliximab），2008年销售额达3748亿美元，比2007年增长127%；治疗贫血的药物重组红细胞生成素Procrit（Epoetin alfa）2008年销售额达246亿美元，比2007年增长了147%。重组蛋白药物逐渐成为治疗人类重大疾病的主流药物。
我国生物医药领域起步较晚，技术方面还相对落后。但是中国政府对生物医药领域的发展给予了高度重视，2007年国务院制定了我国“十一五”生物产业发展规划，把生物医药产业作为拯救千百万危重病人的民生工程，作为提高中华民族国际地位的世纪工程之一。截至2007年，全国进入临床研究的生物新药已达150多个，已有基因工程干扰素等21种生物技术药物投入生产，脑恶性胶质瘤、血友病B等疾病的6种有自主知识产权的基因治疗方案进入临床阶段。
中国的生物医药事业正方兴未艾，需要大量的技术人员和后备力量。本人曾在美国Eli Lilly制药公司工作多年，从事生物医药的研发工作，积累了大量的理论基础和实践经验。2006年回国，为将一生所学献给祖国的生物医药事业，特组织有关专家学者编写此书。
生物医药的核心是重组蛋白药物，本书以当前国际上竞争最激烈的基因工程药物、抗体工程药物和基因工程疫苗为重点，并涵盖了研发基因工程药物的基本理论和相关技术。此书将面向21世纪高等学校生物制药专业的学生和教师，以及具有一定生物学基础的生物制药公司、企事业的专业技术人员和管理人员。希望此书的出版能为祖国生物医药的发展尽微薄之力。
在此书完成之际，感谢李宁、谷学佳、高学慧、高振秋、郝健权、曲栗、张巧、齐云峰、王菁、颜世君、孙阳、王琪、高红梅、王秋颖、张振宇、张宇、刘艾林、曹荣邱和刘雪莹等在书稿的校对过程中付出的辛勤工作。
由于时间仓促和水平所限，书中难免有不妥之处，望读者批评指正，在此表示不胜感谢。
李德山
2009年9月
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