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編輯推薦: |
本教材共包括八章实验和附录内容。在教材的编写体例上,按照实验目的、原理、材料、实验步骤、实验结果、注意事项、临床意义、思考题几个方面的顺序编排,使学习者一目了然;实验项目基本上是教师多年教学和科研实践证明的切实可行的实验,并且增加了一些有利于学生综合素质和创新能力培养的综合实验,以及与临床疾病检测相关的实验内容,同时也关注实验操作中的关键环节和实验的基本技能的介绍。本教材概念准确、条理清楚、简明扼要,具有科学性、先进性、实用性和可操作性。本教材适用于高等医学院校本科生及研究生医学免疫学实验教学,以及相关医学研究的科技和医务工作者参考。
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內容簡介: |
本教材主要包括以下内容:抗体制备技术、抗原抗体反应、免疫标记技术、免疫细胞检测技术、细胞因子及其受体的检测、 HLA分型技术、免疫 PCR技术、超敏反应的检测、免疫学常用实验动物技术、免疫学实验常用仪器、常用试剂的配制、常用免疫学检验正常值、试剂的浓度。 本教材可作为高等医药院校本科生及研究生医学免疫学课程的实验教材,也可供医学同行参考。
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目錄:
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第 1章 抗体制备技术 1
实验一 多克隆抗体的制备 .1
一、抗体制备的流程 .1
二、兔抗人全血清的多克隆抗体制备 .3
三、兔抗羊红细胞的多克隆抗体制备 .5
实验二 单克隆抗体的制备 .6
实验三 抗体的纯化与保存 .11
一、特异性抗体的纯化 .11
二、 IgG的纯化 .11
三、 IgM的纯化 .15
四、 SDS-PAGE法检测免疫球蛋白纯度 .16
五、抗体的保存 .17
第 2章 抗原抗体反应 18
实验四 凝集反应 .18
一、 ABO血型的鉴定(玻片法) .18
二、 SPA协同凝集试验颗粒性抗原的检测 .20
三、间接凝集抑制试验妊娠检验 .22
四、间接血凝试验 .22
五、反向间接血凝试验 .24
实验五 免疫沉淀反应 .25
一、双向免疫扩散 .25
二、单向免疫扩散 .26
三、环状沉淀试验血迹鉴定 28
四、琼脂凝胶对流免疫电泳 29
五、火箭免疫电泳试验 .30
六、免疫浊度测定 .32
实验六 补体结合试验 .33
实验七 免疫印迹技术 .35
VI 医学免疫学实验
第 3章 免疫标记技术 39
实验八 酶免疫技术 39
一、酶联免疫吸附试验 .39
二、酶免疫组织化学技术 42
实验九 荧光免疫技术 .43
一、直接免疫荧光法检测 B细胞膜表面免疫球蛋白 .43
二、间接免疫荧光法检测痢疾杆菌 .44
实验十 生物素 -亲和素技术 .46
第 4章 免疫细胞检测技术 48
实验十一 人外周血单个核细胞分离及观察 .48
实验十二 T细胞功能检测 49
一、 T淋巴细胞转化试验 49
二、 E花环形成试验 51
三、流式细胞术检测法 .52
四、 CTL介导的细胞毒试验 .53
实验十三 B细胞功能检测溶血空斑试验 55
实验十四 固有免疫细胞功能检测 .56
一、炎症模型建立及细胞吞噬现象观察 .56
二、 NK细胞介导的细胞毒试验 .58
第 5章 细胞因子及其受体的检测 60
实验十五 白细胞介素 -1的检测 60
实验十六 白细胞介素 -2的检测 62
实验十七 白细胞介素 -2受体的检测 63
一、可溶性白细胞介素 -2受体的检测 .64
二、膜结合型白细胞介素 -2受体阳性细胞检测 65
实验十八 肿瘤坏死因子的检测 .66
一、肿瘤坏死因子的含量检测 66
二、肿瘤坏死因子的活性检测 67
第 6章 HLA分型技术 . 69
实验十九 补体介导的细胞毒试验 .70
实验二十 混合淋巴细胞培养 .71
实验二十一 PCR-SSP检测 HLA-B27 .72
实验二十二 HLA基因分型限制性片段长度多态性法 73
第 7章 免疫 PCR技术 76
实验二十三 免疫 PCR法检测人肿瘤坏死因子 76
第 8章 超敏反应的检测 79
实验二十四 豚鼠过敏试验 .79
实验二十五 青霉素过敏试验 .80
实验二十六 血清 IgE测定 .81
一、血清总 IgE测定 .82
二、特异性 IgE测定 .83
实验二十七 自身抗体检测 .83
一、抗核抗体检测 .84
二、抗胰岛素抗体检测 .85
实验二十八 循环免疫复合物检测 .86
一、 PEG沉淀法检测循环免疫复合物 86
二、含甲状腺球蛋白免疫复合物的测定 .87
实验二十九 类风湿因子的检测 .88
一、胶乳凝集试验测定类风湿因子 88
二、 ELISA法测定类风湿因子 89
实验三十 结核菌素试验 .90
实验三十一 植物血凝素皮肤试验 .91
附录 93
附录 Ⅰ 试剂的浓度 .93
附录 Ⅱ 常用免疫学检验正常值 .94
附录 Ⅲ 常用实验动物技术 .96
附录 Ⅳ 免疫学实验常用仪器 .99
附录 Ⅴ 免疫学常用试剂的配制 .103
附录 Ⅵ 实验室规则 .106
附录Ⅶ 医学免疫学实验报告册 .107
参考文献 122
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內容試閱:
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医学免疫学是生命科学的前沿学科,也是医学生的主干必修课程之一。随着免疫学理论和技术的迅猛发展,免疫学越来越广泛地与其他基础学科、临床学科交叉融合,并有力地推动了基础医学、临床医学、预防医学乃至整个生命科学的不断发展。
近年来,随着我国高等教育的不断改革和创新人才教育的不断深入,能力培养已引起高校的普遍关注。为进一步贯彻高校十三五规划,培养厚基础、宽口径、重实践、求创新的医学人才,将创新精神、创业意识和创新创业能力教育融入人才培养的全过程。多年来的教学实践使我们深深体会到实验教学是培养创新型人才的重要环节,是理论教学的重要补充和扩展。它不仅能对理论课内容加以验证,巩固课堂上所学的知识,提高学生的学习兴趣;更重要的是培养学生的科学态度、自主学习能力、独立思考能力、解决问题能力和综合应用能力。综观免疫学的发展历史,在实验研究中应用新的实验方法和技术往往可引起免疫学理论研究的突破。免疫学实验方法和技术在临床实践中的应用极大地提高了临床诊断的水平,不仅有利于临床疾病的防治工作,而且在生命科学诸多领域的实验研究中也发挥了独特的作用。
本教材共包括八章实验和附录内容。在教材的编写体例上,按照实验目的、原理、材料、实验步骤、实验结果、注意事项、临床意义、思考题几个方面的顺序编排,使学习者一目了然;实验项目基本上是教师多年教学和科研实践证明的切实可行的实验,并且增加了一些有利于学生综合素质和创新能力培养的综合实验,以及与临床疾病检测相关的实验内容,同时也关注实验操作中的关键环节和实验的基本技能的介绍。本教材概念准确、条理清楚、简明扼要,具有科学性、先进性、实用性和可操作性。本教材适用于高等医学院校本科生及研究生医学免疫学实验教学,以及相关医学研究的科技和医务工作者参考。
本教材由河南科技大学教师齐静姣、刘熔增、刘建成、冯书营、李智涛、赵玲、祁秋阳和洛阳市第六人民医院的检验技师王肖引共同编写完成。本教材在编写过程中参阅的部分文献列于书后,在此向相关作者表示衷心感谢。编写本教材的过程也是一个不断学习、交流、提高认识和追求创新的过程。由于编写时间仓促,编者的水平有限,书中难免会有疏漏和不妥之处,真诚希望广大师生和同行专家在使用过程中提出宝贵意见和建议,以便日后不断完善、充实与提高。
齐静姣
2017年9月
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