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| 編輯推薦： |
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《核酸扩增技术原理及应用》是我国湖泊富营养化区域差异性分析研究成果的整合，整体上反映不同湖泊区域营养物水平、富营养化效应及富营养化驱动因素的区域差异性。
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| 內容簡介： |
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核酸扩增是一大类技术方法的总称，目前包括常规PCR、实时荧光PCR、等温核酸扩增技术等。《核酸扩增技术原理及应用》对核酸扩增所涵盖的各种技术从原理、操作要求及注意事项等方面进行了阐述，比较系统地反映了核酸扩增的全貌，并整理了各种核酸扩增技术在动植物检疫、食品安全及转基因检测等领域的标准方法，及各种仪器的使用、保养与维护，相信会在一定程度上给广大同行提供便利。
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| 關於作者： |
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郑文杰，天津出入境检验检疫局研究员。先后从事转基因产品、过敏原成分、食源性致病菌及农药残留和生物毒素、加热终点温度等食品安全因子的生物学快速检测方法、辐照食品鉴别等方法研究和应用。针对出入境急待解决的技术难题及食源性致病菌、农兽药残留、生物毒素等食品安全危害因子，研发了多种检测技术，多数研究成果填补国内空白，达到国际先进水平。参与转基因重大专项中“转基因精准检测方法研究”、 “十一五”支撑计划重大项目“食品快速检测与质量安全控制技术及设备开发研究”、主编《食品中过敏原及其成分检测》、《辐照食品鉴别技术及应用》。
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| 目錄：
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序
原理篇
第一章 常规PCR技术
第一节 基于DNA的常规PCR技术
第二节 基于RNA的反转录PCR技术
第二章 实时荧光PCR
第一节 TaqMan 探针
第二节 分子信标技术
第三节 LUX引物
第四节 杂交探针法
第五节 荧光染料法
第三章 等温核酸扩增技术
第一节 链替代扩增
第二节 自主序列复制与依赖于核酸序列的扩增
第三节 滚环扩增技术
第四节 环介导的核酸等温扩增技术
第五节 转录介导的扩增技术
第六节 依赖解旋酶的等温扩增技术
第七节 单引物等温扩增
第八节 核酸快速等温检测放大技术
第四章 其他种类核酸扩增技术
第一节 免疫PCR技术
第二节 原位PCR技术
第三节 毛细管PCR技术
第四节 巢式PCR技术
第五节 不对称PCR技术
第六节 复合PCR技术
应用篇
第五章 核酸扩增技术在动物检疫中的应用
第一节 细菌类疫病
第二节 病毒类疫病
第三节 寄生虫类及其他类疫病
第六章 核酸扩增技术在转基因检测中的应用
第七章 核酸扩增技术在植物检疫中的应用
第一节 核酸扩增技术在植物病原真菌检疫中的应用
第二节 核酸扩增技术在植物病原细菌检疫中的应用
第三节 核酸扩增技术在植物病毒和类病毒检测及研究中的应用
第四节 植物线虫分子鉴定研究进展
第五节 核酸扩增技术在植物昆虫检疫中的应用
第六节 核酸扩增技术在杂草检疫及鉴定中的应用
第八章 核酸扩增技术在食源性微生物检测中的应用
iv第九章 核酸扩增技术在成分检测中的应用
第一节 核酸扩增技术在食物过敏原成分检测中的应用
第二节 核酸扩增技术在动物源性成分检测中的应用
仪器篇
第十章 核酸提取仪
第十一章 普通PCR仪
第十二章 实时荧光定量PCR仪
第十三章 电泳仪
第十四章 凝胶成像系统
第十五章 基因芯片
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| 內容試閱：
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第一章常规PCR技术第一章常规PCR技术第一节基于DNA的常规PCR技术一、 引言聚合酶链式反应（polymerase chain reaction, PCR），是20世纪后期发展起来的一种体外扩增特异DNA片段的技术，具有快速、简便和灵敏度高的优点。通过PCR，可以使微量的核酸（DNA或RNA）得以脱离于活体生物并进行大量复制，用于研究和检测鉴定。
人类对于核酸的研究已经有百余年的历史。20世纪60年代末70年代初，人们开始致力于研究基因的体外分离技术，但是由于核酸的含量较少，在一定程度上限制了DNA的体外操作。Khorana等于1971年最早提出在体外使DNA变性，并与适当引物杂交，然后用DNA聚合酶延伸，从而达到克隆DNA的设想。但是，当时的基因序列分析方法尚未成熟，对热具有较强稳定性的DNA聚合酶还未被发现，寡核苷酸引物的合成仍处在手工、半自动合成阶段，这种想法似乎没有任何实际意义。
1985年，美国科学家Kary Mullis在高速公路的启发下，经过两年的努力，发明了PCR技术，并在Science杂志上发表了关于PCR技术的第一篇学术论文Saiki R K,Scharf S，Faloona F,Mullis K B,Horn G T,Erlich H A,Arnheim N.Enzymatic amplification of β?globin genomic sequences and restriction site analysis for diagnosis of sickle cell anemia.Science,2304732:1350?1354.。从此，PCR技术得到了生命科学界的普遍认同，Kary Mullis也因此获得1993年的诺贝尔化学奖。但是，最初的PCR技术相当不成熟，在当时是一种操作复杂、成本高昂、“中看不中用”的实验室技术。1988年年初，Keohanog通过对所使用酶的改进，提高了扩增的真实性。而后，Saiki等又从生活在美国黄石公园温泉中的水生嗜热杆菌内提取到一种耐热的DNA聚合酶，使得PCR技术的扩增效率大大提高。也正是此酶的发现使得PCR技术得到了广泛的应用，使该技术成为遗传与分子生物学分析的基石。在以后的几十年里，PCR方法被不断改进：它从一种定性的分析方法发展到定量测定；从原先只能扩增几kbp的基因到目前已
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