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內容簡介: |
本书作者所在的发酵工程学科是我国最早授予的国家重点学科之一,参与编写者在教学与科研上都有较为丰富的实践经验和研究成果。
本书延续了《现代发酵微生物实验技术》第一版编写中图文并茂,有论述,有操作,有结果的特色。
在内容上保留了显微技术、微生物细胞特殊结构的观察、噬菌体、标记菌种获得与应用、原生质体系列育种技术和固定化细胞生物转化等实用技术,并结合本研究室近几年的研究经验,对基因工程育种技术部分实验进行了修订,增加了基因敲除、定点突变、表达蛋白提纯等实验技术,使该章节体系更完善。
新增了第八章菌种保藏与机构和第二章中酵母菌子囊孢子的形成及观察等相关实验技术。
本书适合高等院校微生物学、发酵工程、生物工程、食品工程等专业的高年级本科生及研究生阅读使用,也可供相关科研人员参考。
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目錄:
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第一章 显微技术
第一节 显微观察
一、相差显微镜
实验1?1相差显微镜的使用
二、荧光显微镜
实验1?2荧光显微镜的使用
三、电子显微镜
实验1?3 细菌、酵母菌超薄切片的透射电镜观察
实验1?4 噬菌体的透射电镜观察
实验1?5 质粒DNA的透射电镜观察
实验1?6 酵母细胞的扫描电镜观察
第二节 显微摄影
实验1?7 显微摄影、菌落摄影和凝胶摄影
第三节 放射自显影
实验1?8 硝酸纤维素滤纸上标记DNA的放射自显影
第四节 显微操作技术用于单细胞分离
实验1?9 显微操纵器用于单细胞分离
实验1?10 显微操纵器用于酵母子囊的解剖及子囊孢子单孢化
实验1?11 玻璃微型工具的制作
第五节 流式细胞仪测定细胞核内DNA的含量
实验1?12 流式细胞仪计数法
第二章 微生物细胞特殊结构的观察
第一节 染色技术
一、染色的基本原理
二、染料
三、染色
实验2?1 真菌的荧光染色与观察
第二节 细胞主要结构成分的分离与观察
实验2?2 革兰阳性细菌细胞壁的制备
实验2?3 酵母细胞壁甘露聚糖的制备
实验2?4 细胞壁的形态观察
实验2?5 革兰阴性菌细胞外膜蛋白的分离
实验2?6 细菌荚膜的观察
实验2?7 细菌鞭毛的观察
实验2?8 微生物细胞核的观察
实验2?9 细菌染色体DNA的分离与观察
实验2?10 异染颗粒的观察
实验2?11 酵母细胞内脂肪颗粒和肝糖颗粒的观察
实验2?12 酵母液泡及线粒体的提取
第三节 芽孢、子囊孢子和假菌丝的观察
一、芽孢
实验2?13 细菌芽孢形成及发芽的观察
实验2?14 伴孢晶体的观察
二、酵母子囊孢子
实验2?15 酵母子囊孢子的形成及观察
实验2?16 酿酒酵母单倍体细胞的制备与鉴定
三、流式细胞术
实验2?17 酿酒酵母染色体倍性鉴定
四、酵母假菌丝
实验2?18 酵母假菌丝的观察
第三章 噬菌体
实验3?1 噬菌体的分离与纯化
实验3?2 高效价噬菌体原液的制备
实验3?3 溶源菌的鉴定
实验3?4 抗噬菌体产?淀粉酶菌株的选育
第四章 标记菌种的获得与应用
第一节 富集培养技术在获得标记菌种中的应用
一、营养缺陷型富集法在原核细胞中的应用
实验4?1 芽孢杆菌营养缺陷型的筛选
二、营养缺陷型富集法在真核细胞中的应用
实验4?2 酵母营养缺陷型的筛选
实验4?3 青霉菌营养缺陷型菌株的筛选
三、浓度梯度法富集抗性突变株
四、富集法在研究次级代谢的重组DNA技术中的应用
第二节 营养缺陷型标记菌种的获得
一、诱变方法
二、淘汰野生型
三、检出缺陷型
四、营养缺陷型生长谱的确定
实验4?4 芽孢杆菌营养缺陷型生长谱的确定
第三节 呼吸缺陷型标记菌种的获得
实验4?5 酵母呼吸缺陷型的筛选
第四节 抗反馈调节抗性突变株的获得与应用
实验4?6 氨基酸抗反馈调节突变株的选育
第五章 原生质体系列育种技术
第六章 基因工程育种技术
第七章 微生物细胞固定化方法
第八章 菌种保藏方法与机构
参考文献
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